ഫ്ലോ സൈറ്റോമെട്രിയിൽ ഫിൽട്ടറുകളുടെ പ്രയോഗം.

ഫ്ലോ ചേമ്പറിന് മുന്നിലുള്ള ഒപ്റ്റിക്കൽ സിസ്റ്റത്തിൽ ഒരു ലെൻസും പിൻഹോളും അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു. ലെൻസിന്റെയും പിൻഹോളിന്റെയും (സാധാരണയായി രണ്ട് ലെൻസുകളും ഒരു പിൻഹോളും) പ്രധാന പ്രവർത്തനം ലേസർ ഉറവിടം പുറപ്പെടുവിക്കുന്ന വൃത്താകൃതിയിലുള്ള ക്രോസ്-സെക്ഷനോടുകൂടിയ ലേസർ ബീമിനെ ചെറിയ ക്രോസ്-സെക്ഷനുള്ള ഒരു ദീർഘവൃത്താകൃതിയിലുള്ള ബീമിലേക്ക് കേന്ദ്രീകരിക്കുക എന്നതാണ്. ഇത് ഒരു സാധാരണ വിതരണത്തിനനുസരിച്ച് ലേസർ ഊർജ്ജം വിതരണം ചെയ്യുന്നു, ലേസർ കണ്ടെത്തൽ മേഖലയിലുടനീളമുള്ള കോശങ്ങൾക്ക് സ്ഥിരമായ പ്രകാശ തീവ്രത ഉറപ്പാക്കുകയും വഴിതെറ്റിയ വെളിച്ചത്തിൽ നിന്നുള്ള ഇടപെടൽ കുറയ്ക്കുകയും ചെയ്യുന്നു.

മൂന്ന് പ്രധാന തരം ഫിൽട്ടറുകൾ ഉണ്ട്: 

1: ലോങ് പാസ് ഫിൽറ്റർ (LPF) - ഒരു പ്രത്യേക മൂല്യത്തേക്കാൾ ഉയർന്ന തരംഗദൈർഘ്യമുള്ള പ്രകാശത്തെ മാത്രമേ കടന്നുപോകാൻ അനുവദിക്കൂ.

2: ഷോർട്ട്-പാസ് ഫിൽട്ടർ (SPF) - ഒരു പ്രത്യേക മൂല്യത്തിൽ താഴെയുള്ള തരംഗദൈർഘ്യമുള്ള പ്രകാശത്തെ മാത്രമേ കടന്നുപോകാൻ അനുവദിക്കൂ.

3: ബാൻഡ്‌പാസ് ഫിൽട്ടർ (BPF) - ഒരു പ്രത്യേക തരംഗദൈർഘ്യ പരിധിയിലുള്ള പ്രകാശത്തെ മാത്രമേ കടന്നുപോകാൻ അനുവദിക്കൂ.

വ്യത്യസ്ത തരംഗദൈർഘ്യത്തിലുള്ള ഫ്ലൂറസെൻസ് സിഗ്നലുകളെ വ്യത്യസ്ത ഫിൽട്ടറുകൾ സംയോജിപ്പിക്കുന്നതിലൂടെ വ്യക്തിഗത ഫോട്ടോമൾട്ടിപ്ലയർ ട്യൂബുകളിലേക്ക് (PMTs) നയിക്കാൻ കഴിയും. ഉദാഹരണത്തിന്, PMT യുടെ മുന്നിലുള്ള പച്ച ഫ്ലൂറസെൻസ് (FITC) കണ്ടെത്തുന്നതിനുള്ള ഫിൽട്ടറുകൾ LPF550 ഉം BPF525 ഉം ആണ്. PMT യുടെ മുന്നിലുള്ള ഓറഞ്ച്-ചുവപ്പ് ഫ്ലൂറസെൻസ് (PE) കണ്ടെത്തുന്നതിന് ഉപയോഗിക്കുന്ന ഫിൽട്ടറുകൾ LPF600 ഉം BPF575 ഉം ആണ്. PMT യുടെ മുന്നിലുള്ള ചുവന്ന ഫ്ലൂറസെൻസ് (CY5) കണ്ടെത്തുന്നതിനുള്ള ഫിൽട്ടറുകൾ LPF650 ഉം BPF675 ഉം ആണ്.