ഫ്ലോ സൈറ്റോമെട്രിയിൽ ഫിൽട്ടറുകളുടെ പ്രയോഗം.

(ഫ്ലോ സൈറ്റോമെട്രി , FCM ) സ്റ്റെയിൻഡ് സെൽ മാർക്കറുകളുടെ ഫ്ലൂറസെൻസ് തീവ്രത അളക്കുന്ന ഒരു സെൽ അനലൈസർ ആണ്.സിംഗിൾ സെല്ലുകളുടെ വിശകലനവും തരംതിരിക്കലും അടിസ്ഥാനമാക്കി വികസിപ്പിച്ചെടുത്ത ഹൈടെക് സാങ്കേതികവിദ്യയാണിത്.കോശങ്ങളുടെ വലിപ്പം, ആന്തരിക ഘടന, ഡിഎൻഎ, ആർഎൻഎ, പ്രോട്ടീനുകൾ, ആൻ്റിജനുകൾ, മറ്റ് ഭൗതിക അല്ലെങ്കിൽ രാസ ഗുണങ്ങൾ എന്നിവ വേഗത്തിൽ അളക്കാനും വർഗ്ഗീകരിക്കാനും ഇതിന് കഴിയും, കൂടാതെ ഈ വർഗ്ഗീകരണങ്ങളുടെ ശേഖരത്തെ അടിസ്ഥാനമാക്കിയുള്ളതാകാം.

图片1

ഫ്ലോ സൈറ്റോമീറ്റർ പ്രധാനമായും ഇനിപ്പറയുന്ന അഞ്ച് ഭാഗങ്ങൾ ഉൾക്കൊള്ളുന്നു:

1 ഫ്ലോ ചേമ്പറും ഫ്ലൂയിഡിക്സ് സിസ്റ്റവും

2 ലേസർ പ്രകാശ സ്രോതസ്സും ബീം രൂപപ്പെടുത്തുന്ന സംവിധാനവും

3 ഒപ്റ്റിക്കൽ സിസ്റ്റം

4 ഇലക്ട്രോണിക്സ്, സംഭരണം, ഡിസ്പ്ലേ, വിശകലന സംവിധാനം

5 സെൽ സോർട്ടിംഗ് സിസ്റ്റം

图片2

അവയിൽ, ഫ്ലോ സൈറ്റോമെട്രിയിലെ ഫ്ലൂറസെൻസ് സിഗ്നലുകളുടെ പ്രധാന അളവുകോലാണ് ലേസർ പ്രകാശ സ്രോതസ്സിലും ബീം രൂപീകരണ സംവിധാനത്തിലും ലേസർ ആവേശം.എക്‌സിറ്റേഷൻ ലൈറ്റിൻ്റെ തീവ്രതയും എക്സ്പോഷർ സമയവും ഫ്ലൂറസെൻസ് സിഗ്നലിൻ്റെ തീവ്രതയുമായി ബന്ധപ്പെട്ടിരിക്കുന്നു.ഒറ്റ തരംഗദൈർഘ്യവും ഉയർന്ന തീവ്രതയും ഉയർന്ന സ്ഥിരതയുമുള്ള പ്രകാശം നൽകാൻ കഴിയുന്ന ഒരു യോജിച്ച പ്രകാശ സ്രോതസ്സാണ് ലേസർ.ഈ ആവശ്യകതകൾ നിറവേറ്റുന്നതിന് അനുയോജ്യമായ ഉത്തേജക പ്രകാശ സ്രോതസ്സാണിത്.

图片3

ലേസർ ഉറവിടത്തിനും ഫ്ലോ ചേമ്പറിനും ഇടയിൽ രണ്ട് സിലിണ്ടർ ലെൻസുകൾ ഉണ്ട്.ഈ ലെൻസുകൾ ലേസർ സ്രോതസ്സിൽ നിന്ന് ഒരു ചെറിയ ക്രോസ്-സെക്ഷൻ (22 μm × 66 μm) ഉള്ള ഒരു ദീർഘവൃത്താകൃതിയിലുള്ള ബീമിലേക്ക് പുറപ്പെടുവിക്കുന്ന വൃത്താകൃതിയിലുള്ള ക്രോസ്-സെക്ഷൻ ഉള്ള ഒരു ലേസർ ബീം ഫോക്കസ് ചെയ്യുന്നു.ഈ എലിപ്റ്റിക്കൽ ബീമിനുള്ളിലെ ലേസർ ഊർജ്ജം ഒരു സാധാരണ വിതരണത്തിനനുസരിച്ച് വിതരണം ചെയ്യപ്പെടുന്നു, ഇത് ലേസർ ഡിറ്റക്ഷൻ ഏരിയയിലൂടെ കടന്നുപോകുന്ന കോശങ്ങൾക്ക് സ്ഥിരമായ പ്രകാശ തീവ്രത ഉറപ്പാക്കുന്നു.മറുവശത്ത്, ഒപ്റ്റിക്കൽ സിസ്റ്റത്തിൽ ഒന്നിലധികം ലെൻസുകൾ, പിൻഹോളുകൾ, ഫിൽട്ടറുകൾ എന്നിവ അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു, അവയെ ഏകദേശം രണ്ട് ഗ്രൂപ്പുകളായി തിരിക്കാം: ഫ്ലോ ചേമ്പറിൻ്റെ അപ്‌സ്ട്രീം, ഡൗൺസ്ട്രീം.

图片4

ഫ്ലോ ചേമ്പറിന് മുന്നിലുള്ള ഒപ്റ്റിക്കൽ സിസ്റ്റത്തിൽ ഒരു ലെൻസും പിൻഹോളും അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു.ലെൻസിൻ്റെയും പിൻഹോളിൻ്റെയും (സാധാരണയായി രണ്ട് ലെൻസുകളും ഒരു പിൻഹോളും) പ്രധാന പ്രവർത്തനം, ലേസർ സ്രോതസ്സ് പുറപ്പെടുവിക്കുന്ന വൃത്താകൃതിയിലുള്ള ക്രോസ്-സെക്ഷനോടുകൂടിയ ലേസർ ബീമിനെ ചെറിയ ക്രോസ്-സെക്ഷനുള്ള ദീർഘവൃത്താകൃതിയിലുള്ള ബീമിലേക്ക് ഫോക്കസ് ചെയ്യുക എന്നതാണ്.ഇത് ഒരു സാധാരണ വിതരണത്തിനനുസരിച്ച് ലേസർ ഊർജ്ജം വിതരണം ചെയ്യുന്നു, ലേസർ ഡിറ്റക്ഷൻ ഏരിയയിലുടനീളമുള്ള സെല്ലുകൾക്ക് സ്ഥിരമായ പ്രകാശ തീവ്രത ഉറപ്പാക്കുകയും വഴിതെറ്റിയ വെളിച്ചത്തിൽ നിന്നുള്ള ഇടപെടൽ കുറയ്ക്കുകയും ചെയ്യുന്നു.

 

മൂന്ന് പ്രധാന തരം ഫിൽട്ടറുകൾ ഉണ്ട്: 

1: ലോംഗ് പാസ് ഫിൽട്ടർ (LPF) - ഒരു പ്രത്യേക മൂല്യത്തേക്കാൾ ഉയർന്ന തരംഗദൈർഘ്യമുള്ള പ്രകാശത്തെ മാത്രമേ കടന്നുപോകാൻ അനുവദിക്കൂ.

2: ഷോർട്ട്-പാസ് ഫിൽട്ടർ (SPF) - ഒരു പ്രത്യേക മൂല്യത്തിന് താഴെയുള്ള തരംഗദൈർഘ്യമുള്ള പ്രകാശത്തെ മാത്രമേ കടന്നുപോകാൻ അനുവദിക്കൂ.

3: ബാൻഡ്‌പാസ് ഫിൽട്ടർ (ബിപിഎഫ്) - ഒരു പ്രത്യേക തരംഗദൈർഘ്യ പരിധിയിലുള്ള പ്രകാശത്തെ മാത്രമേ കടന്നുപോകാൻ അനുവദിക്കൂ.

ഫിൽട്ടറുകളുടെ വ്യത്യസ്ത കോമ്പിനേഷനുകൾക്ക് വ്യത്യസ്ത തരംഗദൈർഘ്യങ്ങളിലുള്ള ഫ്ലൂറസെൻസ് സിഗ്നലുകളെ വ്യക്തിഗത ഫോട്ടോമൾട്ടിപ്ലയർ ട്യൂബുകളിലേക്ക് (പിഎംടി) നയിക്കാനാകും.ഉദാഹരണത്തിന്, PMT-ക്ക് മുന്നിൽ പച്ച ഫ്ലൂറസെൻസ് (FITC) കണ്ടെത്തുന്നതിനുള്ള ഫിൽട്ടറുകൾ LPF550, BPF525 എന്നിവയാണ്.PMT യുടെ മുന്നിൽ ഓറഞ്ച്-ചുവപ്പ് ഫ്ലൂറസെൻസ് (PE) കണ്ടുപിടിക്കാൻ ഉപയോഗിക്കുന്ന ഫിൽട്ടറുകൾ LPF600, BPF575 എന്നിവയാണ്.PMT യുടെ മുന്നിൽ ചുവന്ന ഫ്ലൂറസെൻസ് (CY5) കണ്ടെത്തുന്നതിനുള്ള ഫിൽട്ടറുകൾ LPF650, BPF675 എന്നിവയാണ്.

图片5

ഫ്ലോ സൈറ്റോമെട്രി പ്രധാനമായും സെൽ സോർട്ടിംഗിനാണ് ഉപയോഗിക്കുന്നത്.കമ്പ്യൂട്ടർ സാങ്കേതികവിദ്യയുടെ പുരോഗതി, രോഗപ്രതിരോധശാസ്ത്രത്തിൻ്റെ വികസനം, മോണോക്ലോണൽ ആൻ്റിബോഡി സാങ്കേതികവിദ്യയുടെ കണ്ടുപിടിത്തം എന്നിവയ്ക്കൊപ്പം, ബയോളജി, മെഡിസിൻ, ഫാർമസി, മറ്റ് മേഖലകളിലെ അതിൻ്റെ പ്രയോഗങ്ങൾ കൂടുതൽ വ്യാപകമാവുകയാണ്.ഈ ആപ്ലിക്കേഷനുകളിൽ സെൽ ഡൈനാമിക്സ് വിശകലനം, സെൽ അപ്പോപ്റ്റോസിസ്, സെൽ ടൈപ്പിംഗ്, ട്യൂമർ ഡയഗ്നോസിസ്, ഡ്രഗ് എഫിഷ്യസി അനാലിസിസ് തുടങ്ങിയവ ഉൾപ്പെടുന്നു.


പോസ്റ്റ് സമയം: സെപ്റ്റംബർ-21-2023